武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免疫学试剂盒、生化试剂、elisa试剂盒、分子生物学试剂等多用途多属种的---产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。
1. elisa的原理
elisa的基础是抗原或抗1体的固相化及抗原或抗1体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗1体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗1体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,elisa,受检标本(测定其中的抗1体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗1体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗1体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗1体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率---,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到---的敏感度。
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6.酶免疫测定
酶免疫测定(enzymeimmunoassay)可分为均相(homogenous)和非均相(heterogenous)两种类型。在均相e0ia中可不需进行游离的和结合的标记物的分离而直接测定标记物。例如在某种条件下,抗原抗1体反应后形成的酶标记抗原抗1体复合物中的酶失去其对底物作用的活力,因而测出的酶活力直接反映游离的酶标记物。均相e0ia在---检验中较少应用。非均相e0ia需---行游离的和结合的标记物的分离。如前所述,固相载体可用作一种分离手段。这种固相酶免疫测定方法在1971年1初建立时称为酶联免疫吸附剂测定(enzymelinked immunosorbent assay),简称elisa,在国内有译作酶联免疫吸附试验的,虽然含义不完全确切,但已习用。
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3、染色弱 原因 解决办法 抗1体浓度过低,孵育时间过短 提高抗1体浓度,孵育时间不能少于60分钟 试剂超过有效使用期 及时更换试剂 操作中,滴加试剂时缓冲液未沥干,致 使试剂稀释 每步滴加试剂前沥干切片中多余的缓冲液(但防止切片干燥) 室温太低,低于15℃ 若室温低于15度,要改放在37℃孵育箱孵育30-60分钟(或4℃冰 箱过夜) 蛋白封闭过度 封闭时间不要超过10分钟 4、染色阴性 原因 解决办法 操作步骤错误 重新试验,设立阳性对照 组织中无抗原 设立阳性对照片,以验证实验结果 一抗与二抗种属连接错误 仔细确定一抗与二抗种属无误
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