武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免疫学试剂盒、生化试剂、elisa试剂盒、分子生物学试剂等多用途多属种的---产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。
6.酶免疫测定
酶免疫测定(enzymeimmunoassay)可分为均相(homogenous)和非均相(heterogenous)两种类型。在均相e0ia中可不需进行游离的和结合的标记物的分离而直接测定标记物。例如在某种条件下,抗原抗1体反应后形成的酶标记抗原抗1体复合物中的酶失去其对底物作用的活力,因而测出的酶活力直接反映游离的酶标记物。均相e0ia在---检验中较少应用。非均相e0ia需---行游离的和结合的标记物的分离。如前所述,固相载体可用作一种分离手段。这种固相酶免疫测定方法在1971年1初建立时称为酶联免疫吸附剂测定(enzymelinked immunosorbent assay),简称elisa,在国内有译作酶联免疫吸附试验的,虽然含义不完全确切,但已习用。
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1.3.2 适比例
在恒定量的抗1体中加入递增量的抗原形成抗1体复合物(沉淀)的量见图1-4。曲线的高峰部分是抗原抗1体比例合适的范围,称为等价带(zone ofequivalence)。在等价带前后分别为抗1体过剩带和抗原过剩带。如果抗原或抗1体极度过剩,则无沉淀物形成,在免疫测定中称为带现象(zone phenomenon)。抗1体过量称为前带(prezone),抗原地过量称为后带(p1ostzone)。在用免疫学方法测定抗原时,应使反应系统中有足够的抗1体量,否则测得的量会小于实际含量,甚至出现假阴性。
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机体被微生物感1染后,先产生igm抗1体,然后产生igg抗1体。经过一段时间,igm抗1体量逐渐减少而消失,而igg抗1体可长期存在,在------后可持续数年之久。
igm抗1体一般为保护性抗1体具有免疫性。因此igm抗1体的测定,对某些传1染病如甲型肝1炎有较高的---诊断价值。右图为为甲型肝1炎病1人血1清中igg抗1体和igm抗1体出现的时间和水平。
1.3 抗原抗1体反应
1.3.1 可逆性
抗原与抗1体结合形成抗原抗1体复合物的过程是一种动态平衡,其反应式为:
ag+ab***ag·ab
抗1体的亲和力(affinity)是抗原抗1体间的固有结合力,可以用平衡常数k表示:
k=[ag·ab]/[ag][ab]
ag·ab的解离程度与k值有关。高亲和力抗1体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合,两者结合牢固,不易解离。解离后的抗原或抗1体均能保持原有的结构和活性,因此可用亲和层析法来提纯抗原或抗1体。在抗血1清中,特---的igg抗1体仅占总igg中的极1小部分。用亲和层析法提取的特---抗1体,称为亲和层析纯抗1体,应用于免疫测定中可得到---的效果。
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