武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免疫学试剂盒、生化试剂、elisa试剂盒、分子生物学试剂等多用途多属种的---产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。
1、染色过强 原因 解决办法 抗1体的浓度过高或抗1体孵育时间过长 降低抗1体滴度(一般指浓缩性抗1体)抗1体孵育时间:室温1 小时或4℃过夜 孵育温度过高,孵育温度超过37℃ 一般室温20-28℃ dab 显色时间过长或 dab 浓度过高 显色时间不能超过5-10分钟,以显微镜下观察为准 2、非特---背景染色 原因 解决办法 操作过程中冲洗不充分 每步冲洗3×5 组织中含---化物酶未阻断 可再配置新鲜3%h2o2封闭,孵育时间延长 组织中含内源性生物素 正常非免疫动物血1清再封闭 血1清蛋白封闭不充分 延长血1清蛋白封闭时间
武汉默沙克生物????科技有限公司是一家专门从事生物制剂研发与生产的企业。目前可提供各种抗1体、免疫学试剂盒、生化试剂、elisa试剂盒、分子生物学试剂等多用途多属种的---产品,服务涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学领域。
elisa试剂盒操作步骤
1. 加样:标准品设定5个浓度点10个孔,每个浓度设定平行孔,加入50微升不同浓度的标准品,空白孔设定1个孔加入50微升蒸馏水(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔,在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,pge2 elisa试剂盒,轻轻晃动混匀。
2. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
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1.3.2 适比例
在恒定量的抗1体中加入递增量的抗原形成抗1体复合物(沉淀)的量见图1-4。曲线的高峰部分是抗原抗1体比例合适的范围,称为等价带(zone ofequivalence)。在等价带前后分别为抗1体过剩带和抗原过剩带。如果抗原或抗1体极度过剩,则无沉淀物形成,在免疫测定中称为带现象(zone phenomenon)。抗1体过量称为前带(prezone),抗原地过量称为后带(p1ostzone)。在用免疫学方法测定抗原时,应使反应系统中有足够的抗1体量,否则测得的量会小于实际含量,甚至出现假阴性。
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